D-荧光素钾盐
D-Luciferin, potassium salt
产品货号：A1241
产品规格：100mg，500mg，1g（棕色玻璃瓶）
英文名称：D-Luciferin, potassium salt
产品信息：
|
CAS号： |
115144-35-9 |
|
分子式： |
C11H7KN2O3S2 |
|
分子量： |
318.41 |
|
纯 度： |
≥98% (HPLC) |
|
外 观： |
浅黄色至黄色 粉末或晶体 |
|
溶解性： |
H2O：17.5mg/mL(54.96 mM; Need ultrasonic <60°C) |
|
储存条件： |
-20℃，干燥避光 |
|
有效期： |
3年 |
产品简介：
D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用 于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光 素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光 量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因 （Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光 素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展 状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发 光强度的变化来指示能量或生命体征。
E-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分 析；高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式：D-荧光素（游离 酸），D-荧光素盐（钠盐和钾盐）。主要差别在于溶解特性：前者的水溶性以 及缓冲体系的溶解性都较弱，除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可 溶于甲醇和DMSO；后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性， 特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实 质性的差别。
使用说明：
一. 体外生物发光检测
1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100 200×) ，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。
2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至0.15-0.3mg/mL的工作液浓度。
3）去除细胞培养基。
4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10min，然后 进行图像分析。
二.活体成像分析
1）用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液， 混匀。
2）用0.2µm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反 复冻融。
3）腹腔注射（i.p.），按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。
4）注射入体内10-15min（待光信号达到最强稳定平台期）后进行成像分 析。
注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高 信号检测时间和信号平台期。
注意事项：
1）请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
2）您选择水作为储备液，请稀释至工作液后，再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用。
3）储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃ 冻存。如果有条件，可对储存液充入氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存 时间长达1年。
4）在进行D-荧光素钾盐的溶解时，应使用无钙镁离子的DPBS，因钙镁离 子可能会抑制荧光素酶的活性，此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响， 从而影响检测。
5）如果要进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染，如操作时戴手套 并使用ATP-free的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。
6）注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实 验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
7）本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。
8）为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
