产品描述
IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。
蓝白斑筛选中,IPTG作为安慰性诱导物诱导细菌内的蛋白表达,X-gal作为生色底物。
其原理为IPTG可诱导载体Lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补),
实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落;
而外源DNA插入质粒的多克隆位点后,可破坏α互补作用,培养基上将长出白色菌落。IPTG也是常用的基因工程中重组蛋白表达的诱导剂。
CAS:367-93-1
英文名称:IPTG Dioxane Free; IPTG (Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside)
中文别名:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷;1-甲基乙基-β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷
分子量:238.31
分子式:C9H18O5S
纯度:≥99%,GC
外观(性状):白色结晶或粉末
溶解性:50 mg/mL,溶于水和乙醇
储运:2-8℃保存,冰袋运输
效期:3年
使用说明:
一、储存液配制
1. 1 M IPTG 溶液配制
称取 2.38 g IPTG,加入去离子水定容至 10 mL,完全溶解后用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌。分装后-20℃储存。
2. 100 mg/mL IPTG 溶液配制
称取 1 g IPTG,加入去离子水定容至 10 mL,完全溶解后用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌。分装后-20℃储存。
二、蓝白斑筛选
1. 以配制 100 mL 培养基为例。
将灭菌后的固体培养基冷却至 55℃以下,加入 200 μL X-gal 溶液(20mg/mL)、100 μL 的 IPTG 溶液(24 mg/mL)和相应的抗生素溶液,混匀后倒平板。
2. 细菌铺板,37℃过夜培养。根据菌体的蓝白色筛选出重组子。
三、原核蛋白表达诱导
1. 配制 1 M 储存液。如果诱导所需 IPTG 终浓度为 0.5 mM,则每升培养基中加入 0.5 mL IPTG 溶液(1M)。
2. 不同蛋白对 IPTG 浓度和摇菌温度要求不同,为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG 浓度需实验者优化。
一般情况下 IPTG 浓度在 0.1 mM-20 mM 之间,可设置不同的 IPTG 浓度梯度。
注意事项:
1)含有 IPTG 的培养基 4℃避光保存,须在 1 周内使用。
2)本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
3)为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。













